La transformación de camote con los genes cry7Aa1 y cry3Cal produjo un total de 7 y 9 eventos transgénicos, respectivamente. Para identificar los eventos con mayor expresión de proteínas Cry se midió la actividad transcripcional en hojas a través del PCR en tiempo cuantitativo (qRT-PCR) usando la metodología de SYBR GreenI, y se detectó la expresión de la proteína Cry en hojas y raíces tuberosas mediante DAS-ELISA, usando anticuerpos policlonales de conejo.
La actividad transcripcional del gen Cry3Cal fue mayor que la de cry7Aa1, habiendo eventos que mostraron 54 y 10 veces más de expresión del transcrito que sus respectivas líneas de referencia (líneas de menor expresión), respectivamente. La expresión de la proteína Cry3Cal fue mayor que la de Cry7Aa1 tanto en hojas como raíces tuberosas, oscilando la expresión en las raíces tuberosas entre 0.15-1.47ug/g y 0.02-0.06ug/g, respectivamente. Estas líneas transgénicas expresan diferentes niveles de toxicidad que puede constituir una importante fuente de resistencia contra el gorgojo de camote.
SE HALLARON LINEAS TRANSGÉNICAS VIABLES
Del total de plantas transformadas se obtuvieron 7 y 9 líneas transgénicas viables con los genes cry7Aa1 y cry3Cal, respectivamente. Todos los eventos transgénicos fueron callo positivo (resistentes a Kanamicina) y presentaron amplificación de banda del gen de interés (PCR positivo).
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